Diagnostic biologique
Le CNRL en collaboration avec le département de Parasitologie-Mycologie du CHU de Montpellier réalise :
– le diagnostic biologique de leishmaniose
– l’identification moléculaire des différentes espèces de Leishmania
1 . Envoi d’un échantillon biologique pour le diagnostic ou l’identification moléculaire
(activité hospitalière du Département de Parasitologie-Mycologie du CHU de Montpellier)
Nature de l’échantillon : pour la leishmaniose viscérale, sang ou moelle osseuse ; pour les leishmanioses tégumentaires, biopsie, grattage, curetage de lésions cutanée ou muqueuse.
PROCÉDURE DE RECUEIL, DE CONSERVATION ET D’ENVOI DES ÉCHANTILLONS
Stockage et envoi des échantillons à +4 °C
Leishmaniose viscérale
Sang veineux périphérique
5 ml de sang veineux sur tube SST pour recherche d’anticorps
5 ml de sang veineux sur tube EDTA pour recherche par PCR
Moelle osseuse
0,5 ml de MO sur tube EDTA pour recherche par PCR
Leishmanioses cutanées ou muqueuses
Sont acceptables selon le type de lésion et les habitudes de prélèvement :
- grattage cutané ou muqueux sur le pourtour de la lésion à l’aide d’une curette
- écouvillonnage appuyé sur écouvillon sec
- ponction/aspiration de la lésion
- biopsie cutanée ou muqueuse
Il est important que les échantillons soient stockés et expédiés à 4°C dans un tube stérile contenant une ou deux gouttes de sérum physiologique stérile afin d’éviter la dessication.
Tout autre type d’échantillon (frottis sur lame, bloc anapath, etc.) peut potentiellement être analysé
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| Téléchargez la fiche : demande de diagnostic | Téléchargez la fiche : demande de diagnostic | Département de Parasitologie-Mycologie, CHU de Montpellier 39, Avenue Charles Flahault 34295 Montpellier cedex 5 tel : 04 67 33 23 50 fax : 04 67 33 23 58 Email : cnr-leishmania | |
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 Répartition géographique LC-LCM |  Répartition géographique LV |
2 . Envoi d’une souche pour typage
(préciser s’il s’agit d’une demande pour la prise en charge d’un patient ou d’une demande d’intérêt scientifique)
– conditionnement de la souche (surnageant de milieu diphasique type NNN, ou milieu de culture liquide) en tube Nunc ou en boite de type Falcon,
– envoi en emballage avec triple enveloppe selon la réglementation en vigueur.
| Ajouter la fichedemande de typage complétée avec le plus de précision possible.
Ne pas oublier, pour l’isoleur d’attribuer un sigle à la souche | Téléchargez la fiche :demande de typage | Département de Parasitologie-Mycologie, CHU de Montpellier CNR des Leishmanioses 39, Avenue Charles Flahault 34295 Montpellier cedex 5 tel : 04 67 33 23 50 fax : 04 67 33 23 58 Email :cnr-leishmania | |
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EXPERTISE EN MATIERE DE TYPAGE ET IDENTIFICATION
Le CNR-L réalise une identification par biologie moléculaire et/ou protéomique, et éventuellement biochimique (isoenzymes), des souches de Leishmania provenant de cas humains, mais aussi des autres mammifères et des phlébotomes.
L’identification moléculaireest basée sur une approche de type MLST (multilocus sequence typing); et l’identification biochimique réalisée par électrophorèse des isoenzymes en gel épais d’amidon. L’identificationparMALDI-TOF MSdéveloppée en collaboration avec l’équipe du Pr Piarroux (La Pitié Salpétrière, Paris), est devenue la technique utilisée en première ligne pour l’identification des souches reçues au CNR-L.
Il est à noter que l’identification moléculaire peut s’effectuer soit directement sur les prélèvements, soit sur les cultures, avec un délai de réponse bref (<10 jours).
Plus de 300 demandes de diagnostic et typage sont enregistrées chaque année au Laboratoire Coordonnateur de Montpellier et plus de 400 au Laboratoire Associé de Cayenne. Les résultats des cultures et des identifications sont adressées aux laboratoires expéditeurs dans un délai variant de 10 jours (identification moléculaire et protéomique) à 2 mois (identification biochimique). L’identification par isoenzymes est réservée aux projets de recherche en collaboration.